基本描述

别名

Dextrin亲和层析树脂 | Dextrin琼脂糖纯化树脂 | Dextrin填料 | MBP标签蛋白填料 | 糊精亲和介质

英文别名

Dextrin Resin | Dextrin Agarose Beads | MBP Resin | MBP Agarose Resin

规格或纯度

BioReagent, 通过内毒素测试, 50% v/v

稳定性与储存

Store at 2-8℃ long term (36 months). Do not freeze.

英文名称

Dextrin Agarose Resin (MBP tag)

储存温度

2-8°C储存,禁止冷冻

运输条件

冰袋运输

产品介绍

储存缓冲液：20% (v/v) Ethanol

本产品是一种将糊精键合在琼脂糖基球上形成的亲和层析分离介质。糊精配基可与麦芽糖结合蛋白（MBP）特异性结合，因而可纯化带MBP标签的融合蛋白。本产品可在接近生理条件下纯化目标蛋白，可最大程度保留目标蛋白的活性。

MBP标签较大，分子量约为42kDa。MBP标签的主要作用有促进目标蛋白正确折叠，增加蛋白的表达水平，提高目标蛋白的可溶性。同时带MBP标签的融合蛋白特定的亲和填料，MBP标签在大肠杆菌体系中经常使用，亲和层析后通常利用特异性酶去除标签。

阿拉丁Dextrin 亲和层析介质储存在20%乙醇中，凝胶和保护液的体积比为1:1，我司产品规格为实际凝胶的体积。

参数	指标
基质	6%交联琼脂糖
配基	糊精
粒径范围 ①	45~165 μm
平均粒径	~90 μm
结合能力 ②	3~5 mg 麦芽糖结合蛋白（约42kDa）/mL
推荐工作流速	60~150 cm/h
最大流速与压力 ③	900 cm/h，0.3 MPa
使用pH	7~9（推荐的工作pH），2~13（CIP清洗）
化学稳定性	在以下溶液中稳定：常用的水相缓冲液、0.5 mol/L NaOH。
储存	20%乙醇，2~8℃
保质期	3年

注：

① 90%体积以上的微球在此粒径范围；

② 测试结果为单位体积填料纯化菌体获得的纯蛋白量，该结果与DBC_10%结果相当；

③ 10cm柱高下的最大测试流速。

使用说明

1、色谱柱装填

以下阐述与层析系统连接时，填料的色谱柱装填方法。

（1）所有需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样，液体最好做脱气处理。

（2）填料用量计算：通过沉降定量填料体积，需要的沉降填料体积=柱体积×压缩比（也称压缩因子）。沉降体积是指填料在20%乙醇保存液中自然沉降完全读取的稳定体积。Dextrin 亲和层析介质的压缩比为1.15。为使达到装柱比，可通过柱头下压的方法，也可以通过高流速压柱。

（3）填料清洗：将填料悬液充分摇匀后量取相应体积，抽滤除去液体，并用约3倍填料体积的纯化水洗涤，重复3次，以除去保存液。

（4）装柱填料悬液准备：将填料转移到适当的容器中，加入适量的装柱液，制成 50~75 v%的装柱填料悬液，使用前搅匀。

（5）装填前准备：在清洗干净的层析柱下端加入装柱液，以除去下垫片及层析柱下端的空气，在柱内保留少量的蒸馏水，拧紧下堵头，调整柱子使其垂直于地面。

（6）装填：将搅匀后的填料悬液一次性缓慢倒入层析柱内（必要时使用装柱器），为避免引入气泡，应使之沿层析柱内壁自然流下。将所有填料加入后，用装柱液将装柱器加满，拧紧装柱器上盖，将柱子与层析系统连接。

（7）压柱：使柱内填料自然沉降（或50~150 cm/h的低流速下沉降），待填料沉降完全后（填料与液体的界面清晰），去除装柱器，装上上柱头，并将柱头下降至界面处；通过高流速（推荐流速见下表，注意柱压不超过0.3 MPa），继续压柱至界面清晰稳定，标记界面稳定时的柱高。停泵，打开柱头上的阀门/堵头，关闭柱底的阀门/堵头，下压柱头至标记位置下方与压缩比对应的位置，旋紧柱头，装柱完成。装柱完成后，需用高流速平衡柱内的填料。

装柱条件	Dextrin 亲和层析介质
压缩比	1.15
装柱流速	600 cm/h

2、柱效测定和评价

完成装柱后、使用前可通过柱效测定和评价可以确认层析柱装填质量。柱效通常用理论塔板高度（HETP）和非对称因子（As）来评价。

柱效测定可以采用丙酮或者NaCl作为样品进行，按照下表配制样品溶液和流动相。

样品	1.0%丙酮	0.8~1.0 M NaCl
样品体积	1.0%柱体积	1.0%柱体积
流动相	纯水	0.4 M NaCl
流速	30 cm/h	30 cm/h
检测器	UV-280 nm	电导

根据UV或者电导率曲线计算理论塔板高度（HETP）、理论塔板数（N）和非对称因子（As），公式如下：

HETP = L / N
N = 5.54 × (Vʀ / Wₕ)²
As = a / b

其中：L为柱高； Vʀ为保留体积；Wₕ为半高峰宽；a为在10%峰高处的第一个半峰宽；b为在10%峰高处的第二个半峰宽。

一般来说，HETP的数值应小于填料平均粒径的三倍（即HETP/D50<3，D50为填料的平均粒径），As应在0.8~1.5之间。

3、推荐缓冲液

推荐用以下缓冲液结合带MBP标签的融合蛋白。

结合缓冲液：20 mM Tris-HCl，200 mM NaCl，1 mM EDTA，pH 7.4

洗脱缓冲液：结合缓冲液 + 10 mM麦芽糖

再生缓冲液：0.5 M NaOH

4、样品纯化

（1）平衡：再用结合缓冲液平衡5个柱体积，建议流速为~150 cm/h。

（2）上样：将准备好的样品上柱，建议流速为20~100 cm/h，可根据实际结合情况选择流速，能获得较好的效果。上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处理样品。并且上柱前应过0.45μm滤膜或高速离心去除不溶物。

（3）再平衡：上样后用结合缓冲液平衡5~10个柱体积，或平衡至基线，洗去杂质，推荐流速为~150 cm/h。

（4）洗脱：用洗脱缓冲液洗6~10个柱体积，建议流速为~150 cm/h，根据需要置换缓冲液。（5）NaOH再生：洗脱目的蛋白后的柱子用纯水清洗3-5个柱体积，并用0.5 M NaOH再生3-5个柱体积，再用纯水清洗至中性，用20%乙醇保存柱子，或用结合缓冲液平衡后进行下一次纯化，建议流速为75~150 cm/h。

5、填料保存

填料的初始保存液为20%乙醇，使用过后可继续用20%乙醇保存。保存温度在2~8 ℃为宜，不可冻存。

This product is an affinity chromatography separation medium formed by coupling dextrin to agarose base beads. The dextrin ligand specifically binds to maltose-binding protein (MBP), enabling the purification of MBP-tagged fusion proteins. The product allows for target protein purification under near-physiological conditions, maximizing the retention of protein activity.

The MBP tag is relatively large, with a molecular weight of approximately 42 kDa. Its main functions include promoting correct protein folding, enhancing expression levels, and improving the solubility of the target protein. MBP-tagged fusion proteins can be purified using specific affinity resins. The MBP tag is commonly used in E. coli expression systems and is typically removed by specific enzymatic cleavage after affinity chromatography.

Aladdin Dextrin Agarose Resin is stored in 20% ethanol, with a settled gel to storage solution ratio of 1:1. The product specification refers to the actual volume of the settled gel.

Parameter	Value / Description
Matrix	6% cross-linked agarose
Ligand	Dextrin
Particle Size Range ①	45~165 μm
Average Particle Size	~90 μm
Binding Capacity ②	3–5 mg MBP (≈42 kDa) / mL resin
Recommended Operating Flow Rate	60~150 cm/h
Maximum Flow Rate & Pressure ③	900 cm/h, 0.3 MPa
Operating pH Range	7–9 (recommended), 2–13 (CIP)
Chemical Stability	Stable in common aqueous buffers and 0.5 M NaOH
Storage Conditions	20% ethanol, 2–8°C
Shelf Life	3 years

Notes:
① Over 90% of the beads fall within this size range.
② Binding capacity is equivalent to DBC_10%, measured as pure protein yield per mL resin from bacterial lysate.
③ Maximum tested flow rate at 10 cm column height.

Protocol

1. Column Packing
The following procedure describes column packing when connected to a chromatography system:
(1) Equilibrate all materials to the operating temperature. Degas liquids if possible.
(2) Resin Quantity Calculation:
Settled resin volume = Column volume × Compression factor (1.15 for this resin).
(3) Resin Preparation: Resuspend the resin slurry thoroughly. Measure the required volume, remove storage solution by filtration, and wash 3 times with ~3 resin volumes of purified water.
(4) Packing Slurry Preparation: Transfer resin to a suitable container and add packing solution to achieve a 50–75% (v/v) slurry. Mix well before use.
(5) Pre-packing Setup: Fill the bottom of the clean column with packing solution to remove air from the bottom frit and outlet. Retain a small amount of liquid, tighten the bottom end fitting, and ensure the column is vertical.
(6) Packing: Pour the well-mixed slurry into the column in one slow, continuous motion (use a packing reservoir if needed). After adding all resin, fill the reservoir with packing solution, attach the top lid, and connect the column to the system.
(7) Compression: Allow the resin to settle naturally (or use a low flow rate of 50–150 cm/h). Apply a high flow rate (600 cm/h; ensure pressure ≤0.3 MPa) until the interface is stable. Mark the stable height, stop the pump, and lower the adapter to the position corresponding to the compression factor (1.15). Tighten the adapter and equilibrate the column at a high flow rate.

Packing Condition	Dextrin Agarose Resin
Compression Factor	1.15
Packing Flow Rate	600 cm/h

2. Column Efficiency Testing
After packing, assess column efficiency using HETP (Height Equivalent to a Theoretical Plate) and As (Asymmetry Factor) with acetone or NaCl as tracers:

Tracer	1.0% Acetone	0.8~1.0 M NaCl
Sample Volume	1.0% CV	1.0% CV
Mobile Phase	Pure Water	0.4 M NaCl
Flow Rate	30 cm/h	30 cm/h
Detector	UV-280 nm	Conductivity

Calculate HETP, N, and As using:

HETP = L / N
N = 5.54 × (Vʀ / Wₕ)²
As = a / b

HETP should be <3× the average particle diameter (HETP/D₅₀ < 3), and As should be 0.8–1.5.

3. Recommended Buffers

Binding Buffer: 20 mM Tris-HCl, 200 mM NaCl, 1 mM EDTA, pH 7.4
Elution Buffer: Binding Buffer + 10 mM maltose
Regeneration Buffer: 0.5 M NaOH

4. Sample Purification
(1) Equilibration: Equilibrate with 5 CV Binding Buffer at ~150 cm/h.
(2) Loading: Load sample at 20–100 cm/h. Pre-treat sample (dialysis, ultrafiltration, or dilution) to match Binding Buffer. Filter through 0.45 μm or centrifuge to remove particulates.
(3) Wash: Wash with 5–10 CV Binding Buffer at ~150 cm/h until baseline is stable.
(4) Elution: Elute with 6–10 CV Elution Buffer at ~150 cm/h.
(5) Regeneration: Wash with 3–5 CV water, regenerate with 3–5 CV 0.5 M NaOH, rinse to neutral pH, and store in 20% ethanol or re-equilibrate with Binding Buffer.

5. Storage
Store in 20% ethanol at 2–8°C. Do not freeze.

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

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货号 (SKU)	包装规格	是否现货
M579144-1ml	1ml	期货
M579144-5ml	5ml	期货
M579144-25ml	25ml	期货

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