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重组赖氨酰内切酶(生化级)

  • 表达系统: E. coli
  • Accession #: P15636
  • 蛋白标签: No tag
  • 生物活性: ≥1.0 AU/mg powder; ≥2.5 AU/mg protein
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基本描述

产品名称 重组赖氨酰内切酶(生化级)
别名 赖氨酰肽链内切酶 | Lys-C内切酶
英文别名 Lysyl Endopeptidase | Lysine Endonuclease
规格或纯度 无动物源, 无载体, GMP, 生物活性, ActiBioPure™, EnzymoPure™, ≥1.0 AU/mg powder; ≥2.5 AU/mg protein
产品介绍

赖氨酰内切酶(LysylEndopeptidase,EC3.4.21.50)又称赖氨酰肽链内切酶、Lys-C内切酶,是一种丝氨酸蛋白酶,最初由Masaki等人从土壤细菌中发现并分离得到。该酶具有高度特异性,可特异性切割赖氨酸残基和S-氨乙基半胱氨酸残基羧基端的肽键。也有报道称具有微量的非特异性切割。本品是从重组大肠杆菌中分离纯化,经冷冻干燥得到的重组赖氨酰内切酶粉末。本品属于生物化学级别的基因工程酶,不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑制剂,具有与天然赖氨酰内切酶相同的活力和特异性。
产品优势
1、无动物源性:无动物病毒、无致病物质、无外源因子污染,安全性高。
2、纯度高:比活高;宿主蛋白残留小于生物制品限度要求。
3、生产规模:1000L以上。
4、合规性:生产设备和生产环境符合相关法规要求,符合GMP指导原则。
5、质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。
产品特性
性状:白色或类白色粉末
纯度:单一主条带(SDS-PAGE)
蛋白含量:30%~70%(见COA)
外源DNA残留量:≤100 ng/mg pro
菌体蛋白残留量≤100 ng/mg pro
最佳pH:8.5~9.5
溶解性:在缓冲液中溶解性良好
推荐使用方法
1、蛋白质的准备
将蛋白质溶解在25mMTris-HCl,pH9.2的溶液中。溶解性低或者需要变性处理的蛋白质可以用最小体积的变性剂,如8M尿素或6M盐酸胍,在25°C~37°C条件下孵育1h使之溶解。需要做二硫键还原处理的蛋白质可以加入终浓度为5mM的DTT或β-巯基乙醇,于50~60°C孵育20分钟使之溶解。调整反应溶液体积使Tris-HCl为25mM,尿素为1M或更低,盐酸胍为0.1M或更低。
2、酶液准备
称取所需的酶粉,用25mMTris-HCl(pH9.2)溶解,使酶液浓度为1~10mg/ml。
3、消化反应
1g多肽或蛋白质推荐酶的用量在1~100AU之间。推荐于25~37°C,反应2~18h。如果需要终止反应,可以加入乙酸或盐酸调节pH至酸性。
注意:
1、为了获得最佳的酶切效果,通常需要蛋白处于可溶、变性和二硫键还原的状态,否则需要加大酶用量。
2、应严格控制盐酸胍和尿素的加入量,尿素高于1M或盐酸胍高于0.1M将会降低重组赖氨酰内切酶的活力
产品用途
1、生物制品的生产,如胰岛素及类似物生产,GLP-1类似物生产。
2、小分子蛋白或多肽的生产,如美容肽,抗菌肽、食品风味肽的生产等。
3、Lys-X化合物的酶催化合成。
4、干细胞、原代细胞的培养,作用更加温和。
运输和储存稳定性
1、运输稳定性:冰袋运输,保证酶活稳定。
2、储存稳定性:于-15°C及以下储存,24个月内稳定;当以pH8.0至pH11.0的Tris-HCl缓冲液配制成酶浓度大于1mg/ml的溶液时,储存于-15°C及以下,反复冻融10次,活性无损失。溶解后2~8°C保存建议不超过7天,-15°C及以下保存建议不超过30天
注意事项与免责声明
1、在1M尿素或0.1%SDS可保留大部分活力。
2、本品具有吸湿性,应室温平衡后再取用。
3、本品仅供研究使用,不得用于动物或人类的诊断或治疗。仅供科研生产使用,不能用于人体。


生物活性 ≥1.0 AU/mg powder; ≥2.5 AU/mg protein
表达系统 E. coli
种属 水解无色杆菌(achromobacter lyticus)
蛋白标签 No tag
无载体 Yes
无动物源 Yes
Accession # P15636
来源 重组表达
预测分子量 31 kDa
SDS-PAGE 31kDa±3.1kDa

储存与运输

物理形态 冻干(Lyophilized)
储存缓冲液 Lyophilized from 10mM PB, pH 7.6.
浓度 ≥1.0 AU/mg powder; ≥2.5 AU/mg protein
储存温度 避光,-20°C储存,干燥,避免反复冻融
运输条件 超低温冰袋运输
稳定性与储存 -20℃ 储存(2年);避免反复冻融;避光;密封。
CAS编号和信息 72561-05-8
酶学委员会编号 EC:3.4.21.50
单位定义 30℃,pH9.5 条件下,每分钟催化底物生成 1μmol 对硝基苯胺的酶量。
分子类型

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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找到3个结果

批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0724584 分析证书 rp220143
ZJ25F0724583 分析证书 rp220143
ZJ25F0724582 分析证书 rp220143

技术文档和文章

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