重组脱氧核糖核酸酶 I，无核糖核酸酶

COA

级别和纯度:

EnzymoPure™

≥95%(SDS-PAGE)
1 U/μl

表达系统: 酵母
Accession #: P00639
生物活性: 1 U/μl

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货号 (SKU)	包装规格	是否现货	价格	数量
R1373644-1KU	1KU	现货

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Accession#: P00639 (2) DNase I (2) DNASE1 (2) Gene ID: 282217 (2) mRNA药物用酶 (26)

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基本描述

产品名称

重组脱氧核糖核酸酶 I，无核糖核酸酶

英文别名

Deoxyribonuclease I | Deoxyribonuclease-1 | DNASE1 | D665537

规格或纯度

EnzymoPure™, ≥95%(SDS-PAGE), 1 U/μl

产品介绍

本产品是重组表达来源的 DNase I (Deoxyribonuclease I)，中文名称为脱氧核糖核酸酶 I，是一种可消化单链或双链 DNA 的脱氧核糖核酸内切酶，它识别并切割磷酸二酯键，产生 5' 端为磷酸基团，3'端为羟基的单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸。
DNase I 的活性依赖于 Ca2+，并可被二价金属离子 Mg2+、Mn2+等激活。在 Mg2+ 存在的情况下，该酶可随机识别并切割双链 DNA任意一条链上的任意位点；而在 Mn2+ 存在的情况下，可识别并切割DNA 两条链上几乎相同的位点，产生平末端或有 1~2 个核苷酸突出的粘末端 DNA 片段。

组分和说明

	Component	1KU	Storage
A	DNase I, RNase-free (1 U/μl)	1ml	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
B	10×DNase I Buffer	1.25ml	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

适用范围
1. 去除 RNA 样品中的基因组 DNA 污染。
2. 体外转录：使用 RNA 聚合酶进行体外转录后，用于模板 DNA的去除。
3. 用于 DNase I 足迹法 (DNase I footprinting) 分析 DNA- 蛋白质相互作用。
4. 与 DNA Polymerase I 配合使用，用于缺口平移法标记 DNA。
5. 用于 DNA 随机片段文库构建。
6. 细胞凋亡 TUNEL 检测中部分剪切基因组 DNA 作为阳性对照。

质量控制
蛋白质纯度
使用 SDS-PAGE 凝胶电泳检测，蛋白纯度不低于 95%。

RNase 残留检测
将 1 U DNase I, RNase-free 与 500 ng 总 RNA 在 37℃温育 1 h，使用琼脂糖凝胶电泳检测超过 90% 的 RNA 仍保持完整。

使用方法
1. 去除 RNA 样品中的基因组 DNA 污染
加样体系：

组分	体积
RNA	1 μg
10×DNase I Buffer	1 μl
DNase I, RNase-free (1 U/μl)	1 μl
Nuclease-Free Water	up to 10 μl

反应条件：37℃ 15 min。
失活条件：
① 使用加入终浓度 5 mM EDTA 溶液混匀后 75℃ 10min 进行热失活，EDTA 可避免 RNA 在加热过程中与反应体系中的二价阳离子发生水解。若进行此步热失活处理，下游 RT-PCR 或 RT-qPCR 反应体系中需要额外补加终浓度 2.5 mM Mg2+，可避免反应体系中过量的 EDTA影响下游 RT-PCR 或 RT-qPCR 反应。
② 使用柱纯化法或者苯酚 / 氯仿抽提失活 DNase I。

2. 体外转录后模板 DNA 的去除
操作步骤如下：
① 每 0.5 μg 模板 DNA 的转录反应体系中加入 1 U DNase I，酶的用量可以根据实际需要优化。
② 反应条件：37℃ 15 min。
③ 失活条件：柱纯化法或者苯酚 / 氯仿抽提。

注意事项
1. 进行 RNA 样品操作时请在 RNase-free 管中进行加样。
2. 在使用本品进行 RNA 样品中 DNA 的去除实验时，可在反应体系中添加终浓度 1 U/μl RNase Inhibitor, Murine（货号： R350859）以保护 RNA 不被降解。
3. DNase I 对物理变性敏感，混匀时请勿剧烈振荡。
4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套及口罩进行实验操作。

生物活性

1 U/μl

表达系统

酵母

种属

牛(Bovine)

Accession #

P00639

来源

重组表达

储存与运输

物理形态	液体
浓度	1 U/μl
储存温度	-20°C储存,避免反复冻融
运输条件	超低温冰袋运输
稳定性与储存	长期储存-20℃（2年）；避免反复冻融。
单位定义	活性单位 (U) 是指在 37℃ 10 min 能够完全降解 1 μg pUC19 质粒 DNA 所需要的酶量。
分子类型	酶

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

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ZJ25F0826192	分析证书	R1373644

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