| 货号 (SKU) | 包装规格 | 是否现货 | 价格 | 数量 |
|---|---|---|---|---|
| N579101-10ml |
10ml |
现货  |
| |
| N579101-50ml |
50ml |
现货 |
|
| 英文名称 | Ni-NTA 6FF Resin | ||||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 储存温度 | 2-8°C储存,避免反复冻融 | ||||||||||||||||||
| 运输条件 | 冰袋运输 | ||||||||||||||||||
| 产品介绍 |
产品介绍： Aladdin掌握琼脂糖微球核心制备技术，所制微球的机械性能和筛分性能远超行业标准，可以提供涵盖亲和层析、凝胶过滤、离子交换、疏水层析等多种不同类型的蛋白纯化介质。提供多种规格的填料和预装柱，满足实验室和工业生产规模的生物大分子分离纯化需求。 Ni-NTA 6FF Resin 以琼脂糖微球为基质，通过活化偶联次氮基三乙酸（NTA），再螯合 Ni2+所形成的稳定八面体结构。与亚氨基二乙酸（IDA）相比，具有更好的螯合剂、还原剂、碱性的耐受性，如样品中含有1-10mM EDTA或1-10mM β-巯基乙醇或5mM DTT，可正常纯化；在螯合镍的情况下，也可以用0.1MNaOH清洗。 Ni-NTA 琼脂糖凝胶 FF 主要用于纯化带组氨酸标签（His-Tag）的重组蛋白。纯化原理是利用重组蛋白组氨酸标签的咪唑环可与过渡金属 Ni2+形成稳定的配位键，因此能特异、牢固、可逆地吸附于固定这些金属离子的基质，结合了 His-Tag 重组蛋白的 Ni-NTA 琼脂糖凝胶 FF 一般通过增加咪唑浓度进行竞争洗脱。 基础参数：
使用方法： 1.色谱柱装填 （1）所有需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样，液体最好做脱气处理。 （2）在柱子下端加入蒸馏水，以除去柱子中的空气，关闭柱子出口，在柱内保留少量的蒸馏水。 （3）将琼脂糖凝胶连续倒入柱子时，要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降。 （4）柱压不超过 0.3MPa，如果装柱系统中无法测柱压，则正常流速下填装。 （5）填装好的 Ni-NTA 琼脂糖凝胶 FF 柱用 2-5 个柱体积的初始缓冲溶液平衡，建议流速 100cm/h，平衡后的柱子可以用于 His-Tag 重组蛋白的上样和洗脱纯化。 2.上样 （1）缓冲液选择：一般选用 pH6-8 的结合缓冲液，常用缓冲液有 10-00mM 磷酸钠缓冲液、20-200mMTris-HCl 缓冲液等。在缓冲液中一般要加入 0.15-0.5M 的 NaCl，以消除离子交换作用。在初次使用 Ni-NTA琼脂糖凝胶 FF，推荐使用 50mM PBS（50 mM NaH2PO4，0.5M NaCl，NaOH 调节 pH 7.4）作为结合缓冲液。 （2）样品处理：样品的缓冲液应与所选结合缓冲液一致。为保证缓冲液一致，可以在结合缓冲液中破碎细菌、或调解 pH 与结合缓冲液一致、或交换至结合缓冲液（常用方法有透析、超滤、脱盐柱换液等）、或用结合缓冲液稀释 2-10 倍等。样品上柱前应 0.45μm 过滤。 3.洗脱 （1）Ni-NTA 琼脂糖凝胶 FF 最常用的洗脱方法为增加咪唑浓度进行洗脱。 （2）咪唑为碱性，相应缓冲液配制后需要用 HCl 进行调节 pH。 （3）在初次使用 Ni-NTA 琼脂糖凝胶 FF，不知道洗脱的咪唑浓度，建议在结合缓冲液中分别加入 10mM、20mM、50mM、100mM、200mM、500mM 咪唑，浓度从低到高，分别洗脱和收集，通过 SDS-PAGE 电泳等方法鉴定洗脱组份。 （4）有条件的也可以进行线性咪唑梯度洗脱，确定较佳洗脱条件。 4.在位清洗 在多次使用后需要在位清洗，常用方法为先 5 个柱体积蒸馏水清洗，再用 1-3 个柱体积 50mM NaOH 清洗10-20min，立即用 5 个柱体积结合缓冲液（50mM PBS）清洗平衡。 用途： 超高刚性 超高刚性琼脂糖基球，耐压骨架支持高流速、大规模的工业化生产 动态载量高 流速下依旧可以保持超高的动态结合能力和特异性吸附效率 产品种类丰富 提供研发及生产阶段的完整解决方案 注意事项： 1. 本产品仅限科学研究使用，不得用于临床诊断和治疗等领域。 2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
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