货号 (SKU)

包装规格

是否现货

价格

数量

M751562-24T

24T

期货

M751562-96T

96T

期货

基本描述

别名

UltraBio™ 多重 PCR 预混液

规格或纯度

BioReagent, 无DNA酶和RNA酶, PCR试剂, for DNA and RNA applications, 分子生物学级

稳定性与储存

Store at -20℃ long term (12 months). Avoid freeze/thaw cycle. Upon receipt, it is recommended to aliquot.

英文名称

UltraBio™ Multiplex PCR Master Mix

储存温度

-20°C储存,避免反复冻融

运输条件

超低温冰袋运输

产品介绍

UltraBio™ Multiple Amplification Mix 是一款通用型多重扩增试剂，可应用于微生物/遗传突变检测多重扩增子文库构建。本试剂兼容超多重扩增，panel 引物重数范围为 1~1500+重，扩增长度范围为100~1800bp，GC 含量范围为 13%~75%，模板投入量低至 1ng。
本试剂原料经过严格的背景菌质控，可有效预防本底扩增导致的假阳性，同时严格的质量控制和功能验证，保证扩增的稳定性和重复性。

本试剂适用于二代测序多重靶向扩增方法微生物/遗传突变检测。

自备材料
仪器：PCR 仪、移液器、磁力架、微型离心机、涡旋仪、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外凝胶成像分析系统、Agilent Bioanalyzer 2100或替代仪器；
试剂：琼脂糖、1×TAE 溶液、核酸染料、DNAmarker、 Ampure XP 磁珠或替代产品、无水乙醇(新鲜配置 80%乙醇)、无核酸酶水；
耗材：1.5 ml 离心管、0.2 ml PCR 管、移液枪头(无DNase/RNase)。

使用说明

一、多重扩增及产物检测
1、将UltraBio™ Multiplex Amplification mix 取出解冻；涡旋混匀瞬时离心，置于冰上备用。
2、在 0.2 ml PCR 管中配制如下反应混合液：

组分	体积/ 反应 (μl)	终浓度
UltraBio™ Multiplex Amplification mix	2.5	4x
Primer Mix	1	20nM (2.5~100nM)
模板 DNA	X	10ng (1~100ng)
无核酸酶水	Up to10	/
Total	10	/

注：常规体系 Total 体积为10μl，可调整体范围为10~50μl；当体系体积放大时，UltraBio™ Multiplex Amplification mix 体积需等比例放大。

3、涡旋混匀，瞬时离心后将反应液收集至管底。
4、将上述 PCR 管置于 PCR 仪，运行以下反应程序：

注：

T：退火温度需要根据多重引物的退火温度 T 来设定。

**：常规为 25 cycles；可根据模板投入量适当调整。

5、第一步扩增产物可用 2 %琼脂糖电泳检测其产物分布情况或在Agilent 2100 Bioanalyzer 上进行长度分布检测。

二、扩增产物磁珠纯化

1、将AmpureXP 磁珠或替代产品从冰箱中取出平衡至室温，涡旋混匀。
2、将第一步扩增产物体积用无核酸酶水补至50ul，加入60 μl(1.2×)磁珠，充分涡旋混匀后室温静置 5 min。

3、短暂离心后将离心管置于磁力架上静置 3~5 min，待溶液澄清后，小心移去上清。
4、保持离心管置于磁力架上，往管中加入 200 μl 新鲜配置的 80%乙醇，室温静置 30 sec，小心移去上清。
5、重复第4操作，80%乙醇共洗涤两次。尽量弃 80%乙醇。
6、保持离心管置于磁力架上，开盖静置 2~3 min 使磁珠干燥至哑光。
7、加入 22 μl 的无核酸酶水重悬磁珠，充分涡旋混匀后，室温静置 2 min，将离心管短暂离心后置于磁力架上静置 1~2 min，待溶液澄清后，小心移取 20 μl 上清至新的 0.2 ml PCR 管中，进行下一步反应。纯化产物可在-20°C 长期保存。

UltraBio™ Multiple Amplification Mix is a universal multiplex amplification reagent that can be used for constructing multiplex amplicon libraries for microbial/genetic mutation detection. It is compatible with ultra-multiplex amplification, with a primer number range of 1 to 1500, amplicon length range of 100 to 1800 bp, GC content range of 13% to 75%, and a minimum template input amount of 1 ng.

The reagent undergoes strict background microbe quality control to minimize false positives from non-specific amplification.

Rigorous functional validation ensures high stability and reproducibility, making it ideal for NGS-based multiplex targeted amplification in microbial/genetic mutation detection.

Self-Supplied Materials

1. Instruments

PCR thermal cycler, Pipettes, Magnetic stand, Microcentrifuge, Vortex mixer, Agarose gel electrophoresis system, UV gel imaging system, Agilent Bioanalyzer 2100 (or equivalent).

2. Reagents

Agarose, 1× TAE buffer, Nucleic acid dye, DNA marker, Ampure XP beads (or equivalent), Freshly prepared 80% ethanol, Nuclease-free water.

3. Consumables

1.5 mL microcentrifuge tubes, 0.2 mL PCR tubes, DNase/RNase-free pipette tips.

Protocol

I. Multiplex Amplification & Product Verification

Reagent Preparation
- Thaw UltraBio™ Multiplex Amplification Mix on ice.
- Vortex briefly and centrifuge before use.
Reaction Setup (10 μL Standard Volume)
Component
Volume per Reaction
Final Concentration
UltraBio™ Multiplex Amplification mix
2.5 μL
4x
Primer Mix
1 μL 20nM (2.5~100nM)
Template DNA
X μL
10ng (1~100ng)
Nuclease-free water
Up to10 μL
/
Total
10 μL /

Note:
Total reaction volume can be scaled to 10–50 μL (adjust mix proportionally).
Primer concentration and annealing temperature (T) should be optimized for each panel.

Mixing & Centrifugation
- Vortex gently and centrifuge briefly to collect liquid.
PCR Cycling Program

*T: Annealing temperature depends on primer panel (optimize empirically).
Cycle number: Adjust based on template input (default: 25 cycles).

Product QC: Analyze amplification success via 2% agarose gel electrophoresis or Agilent 2100 Bioanalyzer.

II. Amplicon Purification (Ampure XP Beads)

Bead Equilibration
- Warm Ampure XP beads to room temperature; vortex thoroughly.
Bead Binding
- Dilute PCR products to 50 μL with nuclease-free water.
- Add 60 μL beads (1.2× ratio), vortex, and incubate 5 min at RT.
Wash Steps
- Place tubes on a magnetic stand for 3–5 min; discard supernatant.
- Wash twice with 200 μL fresh 80% ethanol (30 sec per wash).
- Air-dry beads for 2–3 min until matte.
Elution
- Resuspend beads in 22 μL nuclease-free water; incubate 2 min at RT.
- Transfer 20 μL supernatant to a new PCR tube.
- Store purified products at –20°C.

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

可替换产品

溶液计算器

摩尔浓度计算器

计算溶液所需的质量、体积或浓度。

质量

浓度

体积

分子量

g/mol

稀释计算器

计算配制储备溶液所需的稀释度。

浓度1（C1）

体积 1 (V1)

浓度 2 (C2)

体积 2 (V2)

复溶计算器

复溶计算器允许您快速计算试剂的体积，以复溶小瓶。只需输入试剂的质量和目标浓度，计算器将确定其余部分。

体积（添加到小瓶中）

质量（小瓶）

所需的复溶浓度

UltraBio™ Multiplex Amplification Mix

库存信息