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Bradford蛋白浓度测定试剂盒

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货号 (SKU) 包装规格 是否现货 价格 数量
B774074-1000T
1000T 现货 Stock Image
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蛋白定量 (5)

基本描述

别名 Bradford法蛋白质定量检测试剂盒
规格或纯度 BioReagent, 用于蛋白分析
稳定性与储存 各组分在相应的储存条件下保质期1年。
英文名称 Bradford Protein Assay Kit
储存温度 2-8°C储存,-20°C储存
运输条件 超低温冰袋运输
产品介绍

  阿拉丁生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒 (Bradford Protein Assay Kit) 是根据最常用的两种蛋白浓度检测方法之一Bradford法研制而成,实现了蛋白浓度测定的快速、稳定和高灵敏度,并且检测数据有很好的线性关系。
  Bradford法的检测原理是考马斯亮蓝 (Coommassie Brilliant Blue) G-250与蛋白质的碱性和芳香族氨基酸特别是精氨酸 (Arginine) 在酸性介质中结合后,溶液转变为蓝色,溶液最大吸收峰从465nm迁移到595nm,颜色的变化与蛋白质浓度成正比。因此,可通过检测595nm处的吸光度对溶液中蛋白质浓度进行测定。

组分表

B774074
Component
1000TStorage
B774074A
Bradford蛋白浓度测定染液
100 mL×22-8℃
B774074B
蛋白标准 (5 mg/ml BSA)
1 mL-20℃

本产品有以下优势:

1、检测速度极快,10-80个样品只需不足10分钟即可完成。

2、灵敏度高,检测浓度下限达到25ug/ml,最小检测蛋白量达到0.5ug,待测样品体积为1-20ul。

3、在50-1000ug/ml浓度范围内有较好的线性关系。

4、Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20, 60, 80低于0.015%。含去垢剂的样品推荐使用我们生产的BCA 蛋白定量检测试剂盒(即用型)(货号B736762)或Bradford法蛋白定量试剂盒(去垢剂兼容型)(货号B774078)。  

5、 每个试剂盒可以检测1000个样品。


使用说明:

一、标准品的制备

标准试管法和标准微孔板法标准品的稀释(检测范围=100-1500 μg/ml)

管号稀释液体积
BSA标准品体积
终浓度
A600 μl
400 μl (从5 mg/ml管取)
2000 μg/ml
B125 μl
375 μl (从A管取)
1500 μg/ml
C250 μl
250 μl (从A管取)
1000 μg/ml
D175 μl
175 μl (从B管取)
750 μg/ml
E325 μl
325 μl (从C管取)
500 μg/ml
F325 μl
325 μl (从E管取)
250 μg/ml
G325 μl
325 μl (从F管取)
125 μg/ml
H400 μl
100 μl (从G管取)
25 μg/ml
I400 μl
0
0 μg/ml (空白孔)

微量试管法和微量微孔板法标准品的稀释(检测范围=1-25 μg/ml) 

管号
稀释液体积
BSA标准品体积
终浓度
A3980 μl
20 μl (从5mg/ml管取)
25 μg/ml
B800 μl
3200 μl (从A管取)
20 μg/ml
C1000 μl
3000 μl (从B管取)
15 μg/ml
D1000 μl
2000 μl (从C管取)
10 μg/ml
E1500 μl
1500 μl (从D管取)
5 μg/ml
F1500 μl
1500 μl (从E管取)
2.5 μg/ml
G4000 μl
0
0 μg/ml (空白孔)

二、蛋白浓度测定

试管测定法

A. 标准试管测定法(检测范围=100-1500 μg/ml)

1. 各取0.05ml的标准品和未知样品至相应标记的测试管中。

2. 滴加1.5ml Bradford蛋白浓度测定染液至每管中并充分混匀。

3. 可选参考: 对于大多数情况,在室温下孵育样品10分钟。

4. 设置分光光度计值于595nm并将仪器调零。然后检测所有样品的吸收值。

5. 将所有标准品及未知样品的数值中减去595nm下零孔所对应的平均值。

6. 绘制标准曲线:通过零孔平均值校正每个BSA标准品在其相应浓度下所对应的数值。再用此标准曲线判断得出每个未知样品的蛋白浓度。

B. 微量试管测定法(检测范围=1-25 μg/ml)

1. 各取1.0ml的标准品和未知样品至相应标记的测试管中。

2. 滴加1.0ml Bradford蛋白浓度测定染液至每管中并充分混匀。

3. 可选参考: 对于大多数情况,在室温下孵育样品10分钟。

4. 设置分光光度计值于595nm并将仪器调零。然后检测所有样品的吸收值。

5. 将所有标准品及未知样品的数值中减去595nm下零孔所对应的平均值。

6. 绘制标准曲线:通过零孔平均值校正每个BSA标准品在其相应浓度下所对应的数值。再用此标准曲线判断得出每个未知样品的蛋白浓度。

微孔板测定法

A. 标准微孔板测定法(检测范围=100-1500 μg/ml)

1. 各取10μl的标准品和未知样品至相应标记的微孔板中。

2. 滴加300 μl Bradford蛋白浓度测定染液至每孔混匀并充分震荡30秒。

3. 停止震荡。对于大多数情况,在室温下孵育样品10分钟。

4. 在读数仪器中测量595nm时的吸光值。

5. 将所有标准品及未知样品的数值中减去595nm下零孔所对应的平均值。

6. 绘制标准曲线:通过零孔平均值校正每个BSA标准品在其相应浓度下所对应的数值。再用此标准曲线判断得出每个未知样品的蛋白浓度。

B. 微量微孔板测定法(检测范围=1-25 μg/ml)

1. 各取150μl的标准品和未知样品至相应标记的微孔板中。

2. 滴加150 μl Bradford蛋白浓度测定染液至每孔混匀并充分震荡30秒。

3. 停止震荡。对于大多数情况,在室温下孵育样品10分钟。

4. 在读数仪器中测量595nm时的吸光值。

5. 将所有标准品及未知样品的数值中减去595nm下零孔所对应的平均值。

6. 绘制标准曲线:通过零孔平均值校正每个BSA标准品在其相应浓度下所对应的数值。再用此标准曲线判断得出每个未知样品的蛋白浓度。

注意事项:

1、将G250染液恢复到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度,G250染液使用前请颠倒3-5次,混匀。

2、蛋白标准请在全部溶解后先混匀,再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。

3、为了测试准确,请在试剂加入后的5-20min内测定光吸收,因为在这段时间内颜色是最稳定的。

4、有些阳离子,如K⁺、Na⁺、Mg²⁺、(NH₄)₂SO₄、乙醇等物质不干扰测定,但大量的去污剂如TritonX-100、SDS等严重干扰测定。

5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


名称和识别符

分子类型 试剂盒

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:

通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!

找到2个结果

批号(Lot Number) 证书类型 货号
J2524747 分析证书 B774074
ZJ25F0927136 分析证书 B774074

技术文档和文章

Western Blot
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