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重组内切糖苷酶A (Endo A)

  • 表达系统: E. coli
  • Accession #: Q9ZB22
  • 蛋白标签: N-His
  • 生物活性: ≥2000U/mg protein,单位定义:10 μl 的反应体系中,37℃反应 1 小时从5 μg RNaseB 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量。
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基本描述

产品名称 重组内切糖苷酶A (Endo A)
别名 内切糖苷酶 | 内切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶 | 内切-β-N-乙酰葡萄糖胺酶A | 糖苷内切酶A
英文别名 Endo-β-N-acetylglucosaminidase | mannosyl-glycoprotein endo-beta-N-acetylglucosaminidase | di-N-acetylchitobiosyl beta-N-acetylglucosaminidase | endo-beta-N-acetylglucosaminidase | ENGASE
规格或纯度 ActiBioPure™, 生物活性, 高性能, EnzymoPure™, ≥2000U/mg protein
产品介绍

Endo A 全称糖苷内切酶 A ,基因来源原玻璃蝇节杆菌(Arthrobacter protophormiae),是一种高度特异性糖苷内切酶,可以从糖蛋白上切除没有核心岩藻糖基化的高甘露糖、杂交型 N-聚糖 ,本产品活性高,稳定性好,可以用于抗体糖基化修饰和分析。

组分和说明

rp223107Component1KU5KU10KUStorage
rp223107AEndo-β-N-acetylglucosaminidase A1KU5KU10KU-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
rp223107B10×Glycoprotein Denaturing Buffer (0.5% SDS, 40mM DTT)1000μl1000μl1000μl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
rp223107C10×GlycoBuffer 2 (500 mM Sodium Phosphate, pH7.5)1000μl1000μl1000μl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
rp223107D10% NP-401000μl1000μl1000μl-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

使用前准备:
使用前,请将Endo-β-N-acetylglucosaminidase A试剂取出,加入30-50ul 的无菌去离子水溶解,10000rpm 离心10秒,确保所有试剂都在管底。
反应试剂:将-20℃储存的10×Glycoprotein Denaturing Buffer 缓冲液、10×GlycoBuffer 2 及 10%NP-40 溶液取出,待用。
注意:根据实验需要,准备相应的试剂,如非变性条件下进行去糖基化反应,不需要准备10×Denaturing 缓冲液及10% NP-40 溶液。
使用方法:
变性条件下糖蛋白去糖基化
1、用去离子水溶解 1-20 µg 的糖蛋白,加入 1 µl 的 10×Glycoprotein Denaturing Buffer,用去离子水定容到 10 µl;
2、75℃孵育 10 min;
3、加入 2 µl 的 10×GlycoBuffer 2,2 µl 的 10% NP-40,轻轻吹打混匀;
4、加入 1-4 µl 的 Endo A,加去离子水到 20 µl,轻轻吹打混匀;
5、37℃ 孵育 1-4hr;
6、用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。
非变性条件下糖蛋白去糖基化
1、取 10-100µg 糖蛋白溶液,加入 2µl 10×GlycoBuffer 2,2-5µl Endo A ,补加纯化水使得反应体系总体积为20µl,轻柔混匀;
2、37℃条件下反应 4-24hr。
注意:当对天然糖蛋白去糖基化时,建议将等量糖蛋白样品进行变性后再同步进行酶切实验作为阳性对照,以确定非变性条件下去糖基化反应的程度。
【注】体系放大时候,孵育时间或酶量需要根据实际情况调整,可低速震荡混匀,可以增加转化率。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅作科研用途!


生物活性 ≥2000U/mg protein,单位定义:10 μl 的反应体系中,37℃反应 1 小时从5 μg RNaseB 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量。
表达系统 E. coli
种属 原胸节杆菌(Arthrobacter protophormiae)
蛋白标签 N-His
Accession # Q9ZB22
来源 重组表达
SDS-PAGE 67 kDa

储存与运输

物理形态 液体
储存缓冲液 20 mM Tris-HCl, 200mM NaCl, 10% Glycerol, pH 7.5.
浓度 ≥2000U/mg protein
储存温度 -20°C储存,避免反复冻融
运输条件 超低温冰袋运输
稳定性与储存 长期储存-20℃(18个月);避免反复冻融。
CAS编号和信息 37278-88-9
酶学委员会编号 3.2.1.96
分子类型

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0724205 分析证书 rp223107
ZJ25F0724204 分析证书 rp223107
ZJ25F0724203 分析证书 rp223107

技术文档和文章

溶液计算器