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重组肠激酶

  • 表达系统: 毕赤酵母
  • Accession #: P98072
  • 蛋白标签: No tag
  • 生物活性: 酶活性: ≥5.0 单位/微升。酶活定义:在 25℃,12~16 小时内,将 0.5mg 保存于 25mM Tris-HCI pH 8.0 缓冲液中的融合蛋白切割 95%所需的酶量为 1U。
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基本描述

产品名称 重组肠激酶
别名 肠激酶
英文别名 Enterokinase | EK | Enteropeptidase | TMPRSS15
规格或纯度 无动物源, 无载体, GMP, ActiBioPure™, 生物活性, EnzymoPure™, ≥5.0 U/μL
生化机理 Responsible for initiating activation of pancreatic proteolytic proenzymes (trypsin, chymotrypsin and carboxypeptidase A). It catalyzes the conversion of trypsinogen to trypsin which in turn activates other proenzymes including chymotrypsinogen, procarboxypeptidases, and proelastases.
产品介绍

肠激酶(Enterokinase, EK)是一种高度专一性识别 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶,在 Lys 的 C端水解多肽。具有高度专一性,水解效率高的特点。可在较宽的 pH 范围(4.5~9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白。可除去位于蛋白质 N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签。重组肠激酶采用重组毕赤酵母高效分泌表达技术,经多级层析纯化,制成的高纯度、高活性重组牛肠激酶,不含其他蛋白酶。
产品优势
1、无动物源性:无动物病毒、无致病物质、无外源因子污染,安全性高。
2、 生产规模 1000L 以上。
3、 合规性:生产设备和生产环境符合相关法规要求,符合 GMP 指导原则。
4、质量文件完整:按客户需求,可提供相关法规支持文件。
产品特性
性状:无色至淡黄色澄明液体
pH:7.0~9.0
纯度:单一主条带
宿主蛋白残留: ≤100ng/mg pro.
外源性DNA残留 :≤100ng/mg pro.
推荐使用方法
1、25℃酶切条件为:25mM Tris-HCl pH8.0 体系中融合蛋白 0.1-1mg/ml(蛋白总量 50-100μg),重组EK 0.1~2U,酶切 16~24 小时,用 SDS-PAGE 检测酶切效果。
2、4℃酶切条件为:可在 4℃对底物进行有效低温酶切,但需要将酶切时间延长至 48~64 小时,或增加 2-3倍酶量。低温酶切有时候可获得比 25℃更好的酶切效果。
3、 在>200mM 咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切效果会受影响。可参照以下推荐方法进行酶切:
1) 为获得理想酶切结果,请将样品透析到 25mM Tris-HCl pH 8.0 缓冲液中,再进行酶切;
2) 若不便透析,可将样品稀释,咪唑含量在 100mM 以下,NaCl 浓度在 50mM 以下,甘油浓度 5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白的比例不变(即 1U 酶切 500μg 蛋白);
3) 如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种,且不便去除,此时适当增加酶量或延长酶切时间,也可达到较好酶切效果。
4、可对酶切条件进行优化,例如缓冲液 pH,融合蛋白浓度,EK 的量,以及酶切时间,融合蛋白能在稳定条件下被酶切,用 SDS-PAGE 检测酶切效果。
5、去除重组肠激酶的办法:可使用胰蛋白酶抑制剂亲和层析去除重组肠激酶。

注意:不建议 37℃条件下酶切,可能会有非特异性酶切出现。
运输和储存稳定性
1、运输稳定性:冰袋运输,活性稳定。
2、储存稳定性:-15℃及以下保存,24 个月稳定。25℃保存,一周内无活性损失。缓冲体系:50mM Tris-HCl,pH8.0,250mM NaCl,2mMCa2+,50%甘油。
3、冻融稳定性:反复冻融 5 次,无活性损失。
4、本品仅供研究使用,不得用于动物或人类的诊断或治疗。



生物活性 酶活性: ≥5.0 单位/微升。酶活定义:在 25℃,12~16 小时内,将 0.5mg 保存于 25mM Tris-HCI pH 8.0 缓冲液中的融合蛋白切割 95%所需的酶量为 1U。
表达系统 毕赤酵母
种属 牛(Bovine)
蛋白标签 No tag
无载体 Yes
无动物源 Yes
Accession # P98072
来源 重组表达
预测分子量 25.8 kDa
SDS-PAGE 25.8±2.6 kDa

储存与运输

物理形态 液体
储存缓冲液 50mM Tris-HCl, 250mM NaCl, 2mMCa2+, 50% Glycerol, pH 8.0
浓度 ≥5.0 U/μL
储存温度 避光,-20°C储存,干燥,避免反复冻融
运输条件 超低温冰袋运输
稳定性与储存 -20℃ 储存(2年);收货后建议分装,避免反复冻融;避光;密封。
CAS编号和信息 9017-74-8
酶学委员会编号 EC: 3.4.21.9
分子类型

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
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批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0521770 分析证书 rp220144

溶液计算器