基本描述

别名

BCA蛋白浓度测定试剂盒

规格或纯度

BioReagent, 用于蛋白分析, 即用型

稳定性与储存

各组分在相应的储存条件下保质期1年。

英文名称

Ready-to-use BCA Protein Assay Kit

储存温度

2-8°C储存,-20°C储存

运输条件

超低温冰袋运输

备注

此产品可替代 B736762

产品介绍

BCA 蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于 BCA（Bicin-choninic Acid）法研制而成，实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与 Cu²⁺ 结合生成络合物，同时将 Cu²⁺ 还原成 Cu⁺，BCA 试剂可敏感地与 Cu⁺ 结合，形成稳定的有颜色的复合物，其在 562 nm 处有高的光吸收值，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒含有一系列浓度的蛋白质标准溶液（BSA 溶液），即取即用，无需稀释，方便快捷。
组分表

R1491648	Component	500T	500T×5	Storage
R1491648A	试剂A	100 mL	100 mL×5	2-8℃
R1491648B	试剂B	3 mL	3 mL×5	2-8℃
R1491648C	即用型BSA标准品① (0 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648D	即用型BSA标准品② (125 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648E	即用型BSA标准品③ (250 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648F	即用型BSA标准品④ (500 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648G	即用型BSA标准品⑤ (750 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648H	即用型BSA标准品⑥ (1000 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648I	即用型BSA标准品⑦ (1500 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648J	即用型BSA标准品⑧ (2000 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃

产品特点

方便快捷 — 提供即用型标准品，省去繁琐的稀释步骤；
准确性高 — 变异系数远小于考马斯亮蓝染色法；
线性范围宽 — 灵敏，检测范围：20–2000 μg/mL；
兼容性好 — 与金属离子、还原剂、螯合剂及去污剂兼容性较好。

使用说明（以微孔酶标仪法为例）

1、配置显色工作液：
a. 计算显色工作液总量：
工作液总量 = (BSA 标准品样本个数 + 待测样本个数) × 复孔数 × 每个样本显色工作液体积
举例：BSA 标准品样本个数为 8 个，待测样本个数 3 个，复孔数 3 个。
显色工作液总量 = (8 + 3) × 3 × 200 μL = 6.6 mL
b. 根据计算出的所需显色工作液用量，将试剂 A 和试剂 B 按照 50:1 的体积比，配制显色工作液，充分混匀。
注意：

建议多配制 1–2 个孔的量以弥补加样误差；
新配制的 BCA 工作液室温密封条件下可稳定保存 24 h。

2、定量检测：

① 分别取即用型 BSA 标准品①~⑧ 各 20 μL 加到 96 孔板中（使用前须充分溶解摇匀）：

孔号	1	2	3	4	5	6	7	8
添加物	标准品①	标准品②	标准品③	标准品④	标准品⑤	标准品⑥	标准品⑦	标准品⑧
体积（μL）	20	20	20	20	20	20	20	20
BSA终浓度（μg/mL）	0	125	250	500	750	1000	1500	2000

② 用 1×PBS 或 0.9% 生理盐水将样品适当稀释（可设多个梯度，如 2 倍、4 倍、8 倍稀释），加 20 μL 到 96 孔板的样品孔中；
③ 各孔加入 200 μL 显色工作液，充分混匀，盖上 96 孔板盖，37°C 孵育 30 min，冷却至室温；
注意：也可室温放置 2 h，或 60°C 放置 30 min。吸光度随时间和温度升高而增加，低浓度样品可延长孵育时间或提高温度。
④ 用酶标仪测定每个样品及 BSA 标准品在 562 nm 或 540–590 nm 范围内的吸光度，注意减去空白对照（标准品① + 工作液）的吸光度；
⑤ 绘制标准曲线，计算样品中的蛋白浓度。
注意：去除明显异常值，待测样品浓度需根据标准曲线计算，并乘以稀释倍数。若使用计算机拟合，可从线性方程直接计算。

注意事项

本产品适用于酶标仪（微孔法）或分光光度计（试管法）。使用分光光度计时需确保检测体积不小于比色皿最小要求，样品和标准品用量需按比例放大，可能导致检测次数减少；
试剂低温或长期保存出现沉淀时，可搅拌或 37℃ 温育溶解；
每次测定均需绘制标准曲线，以保证准确性；
若样品中含较多干扰物质（见附表），建议选用其它蛋白定量产品；
操作时请穿实验服并佩戴一次性手套；
本产品仅限科研使用。

The BCA method is one of the most widely used techniques for protein quantification. This kit, based on the bicinchoninic acid (BCA) assay, enables rapid, stable, and sensitive measurement of protein concentrations. Its principle relies on the reduction of Cu²⁺ to Cu⁺ by peptide bonds in an alkaline environment, followed by the formation of a purple-colored complex between Cu⁺ and BCA. This complex exhibits strong absorbance at 562 nm, proportional to protein concentration. The kit includes a series of ready-to-use protein standard solutions (BSA), eliminating the need for dilution and simplifying the workflow.

Product Component List:

R1491648	Component	500T	500T×5	Storage
R1491648A	Reagent A	100 mL	100 mL×5	2-8℃
R1491648B	Reagent B	3 mL	3 mL×5	2-8℃
R1491648C	Ready-to-use BSA standard① (0 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648D	Ready-to-use BSA standard② (125 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648E	Ready-to-use BSA standard③ (250 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648F	Ready-to-use BSA standard④ (500 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648G	Ready-to-use BSA standard⑤ (750 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648H	Ready-to-use BSA standard⑥ (1000 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648I	Ready-to-use BSA standard⑦ (1500 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃
R1491648J	Ready-to-use BSA standard⑧ (2000 μg/mL)	1 mL	1 mL×5	-20℃

Key Features

Convenient: Ready-to-use standards avoid tedious dilution steps.
High Accuracy: Lower coefficient of variation than Coomassie Brilliant Blue assays.
Broad Linear Range: Detection range: 20–2000 μg/mL.
Excellent Compatibility: Tolerates metal ions, reducing agents, chelators, and detergents.

Protocol (Microplate Reader Example)

Prepare Working Reagent:
a. Calculate the total volume required:
Working reagent volume = (Number of standard samples + Number of test samples) × Replicates × Volume per well
Example: 8 standards + 3 test samples with 3 replicates each at 200 μL/well:
(8 + 3) × 3 × 200 μL = 6.6 mL
b. Mix Reagent A and Reagent B at a 50:1 ratio to prepare the working reagent. Vortex thoroughly.
Note:
- Prepare extra volume (1–2 wells) to compensate for pipetting errors.
- Freshly prepared working reagent is stable for 24 hours at room temperature (sealed).
Quantification Steps:① Add 20 μL of each ready-to-use BSA standard (①–⑧) to a 96-well plate (mix thoroughly before use):

Well	1	2	3	4	5	6	7	8
Standard	①	②	③	④	⑤	⑥	⑦	⑧
Volume (μL)	20	20	20	20	20	20	20	20
BSA (μg/mL)	0	125	250	500	750	1000	1500	2000

② Dilute test samples in 1× PBS or 0.9% saline (e.g., 2×, 4×, 8× serial dilutions). Add 20 μL to wells.
③ Add 200 μL working reagent to each well. Mix thoroughly, cover the plate, and incubate at 37°C for 30 min. Cool to room temperature.

Note: Incubation alternatives:

Room temperature: 2 hours
60°C: 30 minutes
Absorbance increases with time/temperature. Extend incubation for low-concentration samples.

④ Measure absorbance at 562 nm (or 540–590 nm) using a microplate reader. Subtract the blank control (Standard ① + working reagent) absorbance.

⑤ Plot a standard curve and calculate sample protein concentrations.

Note:

Exclude obvious outliers.
Multiply calculated concentrations by dilution factors.
Use linear regression for computer-based fitting.

Precautions

Compatible with microplate readers (microplate method) or spectrophotometers (cuvette method). For cuvettes, ensure the volume meets the minimum requirement (may reduce total number of assays).
If precipitates form during cold/long-term storage, stir or warm to 37°C to dissolve.
Always generate a fresh standard curve for each assay to ensure accuracy.
For samples with high levels of interfering substances (see Appendix), consider alternative protein quantification methods.
Wear a lab coat and disposable gloves during operations.
For research use only.

名称和识别符

分子类型	试剂盒

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

输入批号以搜索分析图谱:

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找到1个结果

批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F0927609	分析证书	R1491648

技术文档和文章

r1491648_即用型bca蛋白定量试剂盒产品说明书.pdf

溶液计算器

摩尔浓度计算器

计算溶液所需的质量、体积或浓度。

质量

=

浓度

x

体积

x

分子量

g/mol

稀释计算器

计算配制储备溶液所需的稀释度。

浓度1（C1）

x

体积 1 (V1)

=

浓度 2 (C2)

x

体积 2 (V2)

复溶计算器

复溶计算器允许您快速计算试剂的体积，以复溶小瓶。只需输入试剂的质量和目标浓度，计算器将确定其余部分。

体积（添加到小瓶中）

=

质量（小瓶）

÷

所需的复溶浓度

货号 (SKU)	包装规格	是否现货	价格	数量
R1491648-500T	500T	现货
R1491648-5×500T	5×500T	现货

即用型BCA蛋白定量试剂盒

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