| 货号 (SKU) | 包装规格 | 是否现货 | 价格 | 数量 |
|---|---|---|---|---|
| P1374921-5ml |
5ml |
现货  |
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| P1374921-25ml |
25ml |
现货 |
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| 别名 | 蛋白L琼脂糖珠 | ||||||||||||||||||||||||
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| 英文别名 | Protein L MagBeads | Protein L Magarose Beads | ||||||||||||||||||||||||
| 规格或纯度 | BioReagent, 20% v/v; particle size: 10-37 μm | ||||||||||||||||||||||||
| 稳定性与储存 | Store at 2-8℃ long term (24 months). Do not freeze. | ||||||||||||||||||||||||
| 英文名称 | UltraBio™ Protein L Magnetic Agarose Beads | ||||||||||||||||||||||||
| 储存温度 | 2-8°C储存,禁止冷冻 | ||||||||||||||||||||||||
| 运输条件 | 冰袋运输 | ||||||||||||||||||||||||
| 产品介绍 |
储存缓冲液： 20% (v/v) Ethanol UltraBio™ Protein L琼脂糖磁珠由NHS活化的超顺磁性微球与Protein L共价结合形成。 该产品具有较高的抗体结合能力和较低的蛋白非特异吸附率，洗脱条件均一，一步纯化即可从血清样品中分离出纯度大于90%的抗体；尤其适用于同时纯化多个样品，样本和磁珠的体积范围也可灵活的调整，纯化的过程能够简便的放大，且配备不同的磁力架可同时处理1-96个样本。 本产品每毫升磁珠悬液含约20%琼脂糖磁珠沉淀。 包装规格：20%（v/v）悬液
使用说明： 一、缓冲液配方
二、抗体纯化流程（以纯化人血清为例） 1、样品处理 取人血清100µL（一般血清样品中抗体含量约2-8mg/mL）至1.5mL离心管中，加入900µL Binding/Washing buffer，充分混匀。 2、磁珠预处理 (1) 充分混匀磁珠后，取200µL磁珠悬液到2mL离心管中，磁性分离，弃上清； (2) 加入1mL Binding/Washing Buffer于离心管中，反复颠倒3-5次使磁珠充分重悬，磁性分离，弃上清；该步骤重复一次。 注：磁珠的用量可根据磁珠对目标抗体的最大结合量进行调节，可根据磁珠的抗体结合能力计算磁珠的大概用量，建议磁珠用量应为目标抗体含量的1.2-1.5倍。 3、抗体结合 在处理好的磁珠管中加入步骤1处理的样品溶液，振荡均匀，在室温下置于翻转混合仪或者手动轻轻翻转，使样品和磁珠充分接触混合结合15min，进行磁性分离，弃上清。 4、清洗磁珠 加入1mL的Binding/Washing Buffer于离心管中，反复颠倒3-5次使磁珠充分重悬，磁性分离，弃上清；再重复该步骤2次。 5、目标抗体洗脱 (1) 加入0.5-1mL Elution Buffer，室温下置于翻转混合仪或者手动轻轻翻转10min，置于磁力架上进行磁性分离，收集洗脱液到新的离心管中，即为纯化的目标抗体； (2) 若需要，可重复上述步骤，收集洗脱液至新离心管中，以检测目标抗体是否完全洗脱（Elution Buffer用量建议最终洗脱抗体浓度在0.5-1.2mg/mL，以确保一次洗脱可将95%以上的目标抗体被洗脱下来，用量过少会导致洗脱后仍有部分抗体残留于磁珠上）。 6、抗体中和 在以上含抗体的洗脱液中加入1/10抗体洗脱体积的Neutrilization Buffer，混匀使其pH值保持在中性环境下，以维持抗体的生物活性，避免失活。 三、磁珠后处理 1、向装有磁珠的离心管中加入1mL Elution Buffer，涡旋震荡5s，磁性分离弃上清。重复操作2次。 2、加入1mL Binding/Washing Buffer，涡旋5s，磁性分离弃上清；重复操作2次。 3、加入Storage Buffer 重悬磁珠，置于2-8℃保存。 四、磁珠再生 磁珠多次使用后会有沉淀蛋白、强疏水性蛋白、脂蛋白等杂质非特异性吸附到磁珠上，为了保证磁珠的使用效率，建议持续使用5次后进行磁珠再生处理。 1、按约每1mL（20% v/v）磁珠加入1mL 1%（v/v） TritonX -100磁珠再生缓冲液，振荡均匀，在室温下置于翻转混合仪或者手动翻转混合，10min后进行磁性分离，弃上清； 2、加入1mL Binding/Washing Buffer进行重悬，磁性分离，弃上清，重复该操作3次； 3、加入1mL Storage Buffer重悬磁珠，置于2-8℃保存。 五、流程优化 1、磁珠与抗体的的结合效率与抗体的种属来源及所属亚型有关，请确认抗体的类型与Protein L配基的亲和效率。 2、抗体所属亚型与Protein L的亲和度较低： a. 增加抗体与磁珠的孵育时间（30-120min）； b. 提高结合缓冲液的pH值（8-9）； c. 降低离子强度（25-100mM NaCl）等方法提高亲和效率； d. 选择与目标抗体具有更高亲和度的配基（如Protein G或Protein A）。 3、抗体与Protein L配基亲和度太高导致抗体洗脱效率低： a. 降低洗脱缓冲液的pH 值1.9-2.5； b. 增大洗脱缓冲液的离子强度（可选用 2-3M MgCl ₂ ）； c. 延长洗脱时间， 提高洗脱效率。 注意事项： 1、磁珠使用前应充分混匀，确保磁珠悬液处于均一状态。 2、磁珠使用后于保存液中储存2-8℃，避免冷冻或离心。
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| 批号(Lot Number) | 证书类型 | 货号 |
|---|---|---|
 ZJ25F0826207 |
分析证书 | P1374921 |
| ZJ25F0826202 |
分析证书 | P1374921 |
¥1,099.90
¥1,199.90
¥859.90
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