计算溶液所需的质量、体积或浓度。
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| 货号 (SKU) | 包装规格 | 是否现货 | 价格 | 数量 |
|---|---|---|---|---|
| M666134-5ml |
5ml |
期货 ![]() |
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| M666134-50ml |
50ml |
期货 ![]() |
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| 规格或纯度 | for NGS Size Selection | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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| 英文名称 | MagBead DNA Purification Kit | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 储存温度 | 2-8°C储存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 运输条件 | 冰袋运输 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 产品介绍 |
产品内容:
产品简介 本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的核酸纯化方法。该产品可用于二代测序 建库时DNA的选择性或非选择性回收,以及PCR产物的纯化回收。 CMPure与样品按 一定比例混合后,磁珠选择性将核酸吸附。经两步漂洗后,洗脱得到的DNA纯度高, A260/A280 的比值在 1.7-1.9之间, A260/A230 的比值通常在2.0以上。经该试剂盒纯化得到的 DNA适用于PCR,Real-Time PCR, 测序, southern blotting等实验。 试剂盒说明
自备仪器、试剂 1.磁力架 2.80%乙醇。 3.洗脱液: Buffer EB (10 mM Tris-HCl, pH 8.0);去离子水 (pH在7.0-8.0之间)。 实验前准备及重要注意事项 1.冰冻、离心、超声会对CMPure中的磁珠造成不可逆的损害。 2.CMPure中磁珠长期放置后会聚集成团,从而使磁珠表面积减小,降低样品回收得 率,使用前一定要涡旋振荡彻底混匀磁珠。 3.使用前,建议将CMPure涡旋震荡混匀后分装到1.5 ml的离心管中,每管分装1 ml CMPure。 4.本试剂盒不适用于纯化回收小于100 bp的DNA片段,如果要回收小于100 bp的DNA 片段,建议将CMPure的用量增加到样品体积的4倍。 5.进行DNA的选择性回收时, CMPure对于DNA溶液中的离子浓度较为敏感。不同厂 家的二代测序建库试剂盒得到的接头连接后的DNA溶液以及PCR扩增产物中离子浓 度不同,所以用CMPure做DNA选择性回收时,试剂用量有所不同。 操作步骤 1.涡旋振荡CMPure 20秒,使其彻底混匀为均一溶液。 2.向1.5 ml的离心管中加入纯化的DNA溶液。 3.向上一步的离心管中加入2倍样品体积的CMPure,涡旋震荡5秒后室温静置5分钟。 4.将上一步的离心管放于磁力架上,直至磁珠完全吸附(约需5分钟) 。 5.保持离心管固定于磁力架上,彻底弃去溶液,期间避免接触磁珠。 6.继续保持离心管固定于磁力架上,向离心管中加入250 µl新鲜配置的80%乙醇。 7.保持离心管固定于磁力架上,待悬起的磁珠完全吸附后彻底弃去乙醇。 8.重复步骤6-7两次。 9.保持离心管固定于磁力架上静置放置10分钟,使乙醇完全挥发干净。 10.将离心管从磁力架上取下,加入20-100 µl EB(自备)或去离子水,涡旋振荡使磁珠 完全重悬于洗脱液中后,室温放置5分钟。 11.将离心管放于磁力架上直至磁珠完全吸附(约需5分钟) 。 12.将洗脱液转移至一个新的1.5 ml离心管中。此时,可弃去磁珠。 纯化回收得率的计算 我们建议通过琼脂糖电泳纯化前后的样品进行回收得率的计算。我们不建议通过 260 nm处的光吸收值来计算回收得率。因为溶液中单链、双链DNA和dNTP以及一些纯 化前的某些杂质在260 nm处都有光吸收,这样在计算回收前样品中DNA浓度时会得到一 个假的、虚高的DNA浓度。 Product content:
Product Introduction Kit Description
Preparation and important precautions before the experiment Operation steps |