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LNP 免疫细胞RNA转染试剂盒

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货号 (SKU) 包装规格 是否现货 价格 数量
I1374073-50μl
50μL 现货 Stock Image
I1374073-1.5ml
1.5ml 现货 Stock Image
I1374073-3ml
3ml 期货 Stock Image
I1374073-5ml
5ml 期货 Stock Image

基本描述

别名 LNP RNA 转染试剂(免疫细胞)
规格或纯度 BioReagent, 分子生物学级, 无菌
稳定性与储存 Store at 2-8℃ (1 Years). Do not freeze.
英文名称 LNP RNA Transfection Reagent (Immune Cells)
储存温度 2-8°C储存,禁止冷冻
运输条件 冰袋运输
产品介绍

  LNP免疫细胞系 RNA 转染试剂盒是基于脂质纳米粒(LNP)技术研发的针对 Jurkat 等免疫细胞系的新型即用型转染试剂,利用 LNP 独特的跨膜转运和内体逃逸机制,实现对 RNA 高效递送,适用于不同类型 RNA 在免疫细胞系的体外转染。

  易用:无需特定包封设备,一步混合即可实现 RNA-LNP 瞬时包封,无需孵育。

  高效:微量样品的包封率可达 80%以上,对 Jurkat 等免疫细胞系转染效率轻松达到 80%以上。

  安全:本品采用新型生物可降解脂质材料,细胞毒性极低,且经 0.2μm 微孔滤膜过滤。

产品组分表

I1374073Component50ul1.5 ml3.0 ml5.0 mlStorage
I1374073A免疫细胞 RNA 转染试剂50ul1.5 ml3.0 ml5.0 ml2-8℃
I1374073BBuffer1ml8mL8mL8mL2-8℃

运输与保存方法

  受控常温(≤25℃)运输。2℃~8℃保存。不得冷冻!

适用范围

  LNP免疫细胞系 RNA 转染试剂盒适用于 Jurkat、THP-1、DC2.4、U266、RAW264.7 等免疫细胞系的 RNA 转染,其中 RNA 类型包括 siRNA、miRNA、gRNA 和 mRNA 等。

本产品仅供研究使用。

注意事项

(1) RNA 原液的最佳溶剂为无酶水,且 mRNA 浓度不低于 200ng/μL、siRNA 浓度不低于 10μM,其他类型的溶剂对转染效果可能会有一定影响,具体情况可以联系我们。

(2) 制备 RNA 预混液请确保使用试剂盒专用 Buffer 稀释 RNA 原液,不得使用 PBS 或培养基。

(3) 请确保 RNA 预混液浓度为 40ng/μL。若多种 RNA 共转染,如 CRISPR Cas9 mRNA 与 gRNA 共转染,则 RNA 预混液浓度为 Cas9 mRNA + gRNA 的总浓度,Cas9 mRNA 与 gRNA 的推荐用量比为 1:1~1:2(μgmRNA:μggRNA)。 

(4) RNA/LNP 的比例是 LNP 包封的关键因素,如需增减每孔用量,请按以下操作进行:

1、对于 mRNA 转染和 mRNA+gRNA 共转染,如需增减每孔 mRNA 用量,请按比例增加或减少加入细胞的每孔RNA-LNP复合物的体积。

2、对于 siRNA 转染,如需增加每孔 siRNA 用量,请按比例增加加入细胞的每孔 RNA-LNP复合物的体积。

如需减少每孔 siRNA 用量,LNP转染试剂的最低用量应不低于附录 B 推荐用量。以 96 孔为例,siRNA 每孔用量降为 1.5pmol 时,仅需调整 siRNA 预混液浓度为 1.5μM,转染试剂用量维持在 1μL/孔,其他操作维持不变。

(5) RNA-LNP 复合物在室温条件下可稳定存放 8 小时,请勿将 RNA-LNP复合物置于冷冻条件。

(6) 转染前后均无需更换细胞培养基,含有血清、双抗的完全培养基对转染效果无明显影响;转染 6h 以后可按细胞常规培养流程,进行换液或其他操作。

附录 A:免疫细胞系 mRNA 转染操作说明

1. LNP免疫细胞系 RNA 转染试剂盒操作流程


2. 不同培养容器中每孔 mRNA 和 LNP免疫细胞系 RNA 转染试剂用量 

步骤

试剂

培养容器

 

 

 

 

96 孔板

24 孔板

6 孔板

1) 40ng/μL mRNA 预混液制备

Buffer(以 mRNA 原液浓度 1μg/μL 为例)

2.4μL

12μL

60μL

 

mRNA

0.1μg

0.5μg

2.5μg

2) mRNA-LNP复合物制备

LNP 免疫细胞系 RNA 转染试剂

2.5μL

12.5μL

62.5μL

 

mRNA 预混液

2.5μL

12.5μL

62.5μL

3) 加入细胞

mRNA-LNP复合物

5μL

25μL

125μL

3. 注意事项

(1) 请确保 mRNA 原液的溶剂为无酶水,且浓度不低于 200ng/μL。

(2) 不得使用 PBS 或培养基稀释 mRNA 原液,请确保稀释得到的 mRNA 预混液浓度为 40ng/μL。

(3) mRNA-LNP复合物在室温条件下可稳定存放 8 小时,请勿将 mRNA-LNP复合物置于冷冻条件。

(4) 请注意 mRNA/LNP 的比例是 LNP 包封的关键因素,如需增减每孔 mRNA 用量,您可以按比例增加或减少加入细胞的每孔 mRNA-LNP复合物的体积。

附录 B: 免疫细胞系 siRNA 转染操作说明

1. LNP免疫细胞系 RNA 转染试剂盒操作流程


2. 不同培养容器中每孔 siRNA 和 LNP免疫细胞系 RNA 转染试剂用量 

步骤

试剂

培养容器

 

 

 

 

96 孔板

 24 孔板

 6 孔板

1) 3pmol/μL siRNA 预混液制备 (即 3μM)

Buffer(以 siRNA 原液浓度 10μM 为例)

0.7μL

3.5μL

17.5μL

 

siRNA

3pmol

 15pmol

 75pmol

2) siRNA-LNP复合物制备

LNP 免疫细胞系 RNA 转染试剂

1μL*

5μL*

25μL*

 

siRNA 预混液

1μL

5μL

25μL

3) 加入细胞

siRNA-LNP复合物

2μL

10μL

50μL

*每孔 LNP转染试剂推荐用量为 siRNA 转染的最低用量。

3. 注意事项

(1) 请确保 siRNA 原液的溶剂为无酶水,且浓度不低于 10μM。

(2) 不得使用 PBS 或培养基稀释 siRNA 原液,请确保稀释得到的 siRNA 预混液浓度为 3pmol/μL(即 3μM)。

(3) siRNA-LNP复合物在室温条件下可稳定存放 8 小时,请勿将 siRNA-LNP复合物置于冷冻条件。

(4) 请根据 siRNA 用量调整 LNP转染试剂用量。以 96 孔为例,如每孔 siRNA 用量>3pmol,可按比例增加每孔 siRNA-LNP复合物的体积。例如:每孔需加入 6pmolsiRNA,仅需取 4μL 上述 siRNA-LNP复合物加入细胞即可。

如每孔 siRNA 用量<3pmol,转染试剂用量应维持在 1μL/孔,仅需对应调整 siRNA 预混液的浓度,其他操作维持不变。例如:每孔需加入 1.5pmol siRNA,仅需调整 siRNA 预混液浓度为 1.5μM 即可。

附录 C:免疫细胞系 CRISPR/Cas9 mRNA+gRNA 共转染推荐方案

1. Cas9 mRNA+gRNA 共转染操作流程


2. 不同培养容器中每孔 RNA 和 LNP免疫细胞系 RNA 转染试剂用量 

Cas9 mRNA+gRNA 细胞转染步骤

试剂

96 孔板

24 孔板

6 孔板

1) 40ng/μL RNA 预混液制备

Buffer

4.8μL

24μL

120μL

 

Cas9 mRNA(以 mRNA 原液浓度 1μg/μL 为例)

0.1μg

0.5μg

2.5μg

 

gRNA(以 gRNA 原液浓度 1μg/μL 为例)

0.1μg

0.5μg

2.5μg

2) RNA-LNP 复合物制备

LNP 免疫细胞系 RNA 转染试剂

5μL

25μL

125μL

 

RNA 预混液

5μL

25μL

125μL

3) 加入细胞

RNA-LNP 复合物

10μL

50μL

250μL

3. 注意事项

(1) 请确保 RNA 原液的溶剂为无酶水,且浓度不低于 200ng/μL。使用试剂盒 Buffer 溶液制备 RNA 预混液。

(2) 若多种 RNA 共转染,如 CRISPR Cas9 mRNA 与 gRNA 共转染,则 RNA 预混液浓度(40ng/μL)为Cas9 mRNA + gRNA 的总浓度,Cas9 mRNA 与 gRNA 的推荐用量比为 1:1~1:2(μgmRNA:μggRNA)。

(3) RNA-LNP复合物在室温条件下可稳定存放 8 小时,请勿将 RNA-LNP 复合物置于冷冻条件。

(4) 请注意 RNA/LNP 的比例是 LNP 包封的关键因素,如需增减每孔 RNA 用量,您可以按比例增加或减少加入细胞的每孔 RNA-LNP 复合物的体积。


名称和识别符

分子类型 试剂盒

质检证书(CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):
输入批号以搜索分析图谱:

通过匹配包装上的批号来查找并下载产品的 COA,每批产品都进行了严格的验证,您可放心使用!

找到2个结果

批号(Lot Number) 证书类型 货号
ZJ25F0825979 分析证书 I1374073
ZJ25F0825978 分析证书 I1374073

技术文档和文章

溶液计算器