膜联蛋白V染色

产品描述

          膜联蛋白V（Annexin V）是一种钙离子依赖的磷脂结合蛋白，能够特异性结合暴露在细胞膜外侧的磷脂酰丝氨酸（PS）。在健康细胞中，PS局限于质膜内侧；当细胞进入凋亡过程时，PS会翻转至膜外侧，成为凋亡的重要标志。荧光或其他信号分子标记的Annexin V，在Ca²⁺存在条件下能够实现高灵敏度检测，适用于流式细胞术、荧光显微镜及多种凋亡分析方法。

图1. 细胞凋亡过程中磷脂酰丝氨酸（PS）外翻示意图

为什么使用膜联蛋白V检测细胞凋亡？

          Annexin V能在细胞形态学改变前，通过识别凋亡早期的磷脂酰丝氨酸（PS）外翻，实现早期检测。凭借对PS的纳摩尔级高亲和力，它可精准区分凋亡与存活细胞。Annexin V广泛适用于流式细胞术、显微成像等多种平台，同时兼顾定量分析与PS分布的可视化研究。

用于凋亡检测的膜联蛋白V偶联物

• 灵敏检测，精准区分凋亡阶段：结合PI、7-AAD或DAPI，精确识别早期与晚期凋亡细胞。
• 多种偶联物选择，广泛兼容性：提供AF405、AF488、FITC、PE、APC等多种标记物，适配多种激光系统。

• 操作简便，应用灵活：可单独使用或与细胞核染料组合，支持流式细胞术和荧光显微镜分析。

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膜联蛋白V染色实验条件

          Annexin V检测首选未固定的活细胞/组织。如果样品已被固定，需要特定条件以保持信号强度，先在含Ca²⁺条件下完成Annexin V染色，随后以1%多聚甲醛（PFA）在含Ca²⁺缓冲液中短时固定10–15 min，避免酒精及甲醇固定与任何表面活性剂和渗透步骤。为提高检测效果，我们提供了Annexin V结合缓冲液（A1372288），可优化膜联蛋白V与磷脂酰丝氨酸的结合。该缓冲液具有以下优点：

• 促进特异性结合：缓冲液含有优化浓度的钙离子，可有效促进Annexin V与细胞表面磷脂酰丝氨酸（PS）的结合。
• 适用于早期凋亡检测：为流式细胞术检测早期细胞凋亡提供关键条件，提高检测灵敏度和准确性。

膜联蛋白V染色的应用

Annexin V-FITC（rp226053）–流式细胞术

          U937细胞分别在未处理（左图）或用4 µM喜树碱（camptothecin,C111281）处理4小时（右图）后，采用Annexin V-FITC（rp226053）和碘化丙啶（PI,P1372285）在Annexin V结合缓冲液（A1372288）中染色10分钟，室温孵育。

Annexin V-PE（rp226055）–流式细胞术

           U937细胞在未处理（蓝色）或用5 µM喜树碱（camptothecin,C111281）处理4小时（红色）后，分别在Annexin V结合缓冲液（A1372288）中与Annexin V-PE（rp226055）共同染色，室温孵育10分钟。

细胞凋亡检测试剂盒

         在凋亡早期，由于细胞膜仍保持完整，活性染料（如碘化丙啶PI或7-AAD）无法进入细胞，因此此类细胞仅被Annexin V染色而不被活性染料标记，从而可识别早期凋亡细胞。随着凋亡进展至晚期，细胞膜完整性丧失，Annexin V可结合细胞内的磷脂酰丝氨酸（PS），同时活性染料也能够进入细胞。通过联合检测Annexin V和活性染料，可以将早期凋亡细胞（Annexin V阳性、活性染料阴性）与晚期凋亡或坏死细胞（Annexin V阳性、活性染料阳性）区分开来。

我们的试剂盒专为流式细胞术设计，可用于准确鉴定和计数死亡细胞（包括凋亡和坏死细胞）。

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细胞凋亡检测试剂盒的应用

Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒（A1372286）–流式细胞术

           利用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒（A1372286）对U937细胞进行流式细胞术分析。细胞分别未处理（左图）或用4 µM喜树碱（camptothecin,C111281）处理4小时（右图）。

Annexin V-APC/PI凋亡检测试剂盒（A1372287）–流式细胞术

          利用Annexin V-APC/PI凋亡检测试剂盒（A1372287）对U937细胞进行流式细胞术分析。细胞分别未处理（左图）或用4 µM喜树碱（camptothecin,C111281）处理4小时（右图）。

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