重组糖苷内切酶F1 (Endo F1)

COA

级别和纯度:

≥90%(SDS-PAGE)
≥300 U/mL

表达系统: E. coli
Accession #: A0AAQ1SZ10
蛋白标签: N-His
生物活性: ≥300U/ml，单位定义：10 μl的反应体系中，37℃反应 1 小时从变性的5 μg RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量。

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E755053-300U	300U	现货
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Bacterial (5911) ccession#: A0AAQ1SZ10 (1) Endo F1 (1) Endo-β-N-acetylglucosaminidase F1 (1) endOF1 (1) Glucose Metabolism (3713) 代谢物 (8911) 糖苷内切酶F1 (1)

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基本描述

产品名称

重组糖苷内切酶F1 (Endo F1)

别名

内切糖苷酶F1

英文别名

Endoglycosidase F1 | mannosyl-glycoprotein endo-beta-N-acetylglucosaminidase | di-N-acetylchitobiosyl beta-N-acetylglucosaminidase | endo-beta-N-acetylglucosaminidase | endOF1

规格或纯度

重组, ActiBioPure™, 生物活性, 高性能, EnzymoPure™, ≥90%(SDS-PAGE), ≥300 U/mL

生化机理

来源于米尔伊丽莎白菌的糖苷内切酶F1在蛋白质聚糖结构中壳二糖核心的两个N-乙酰葡糖胺残基的裂解中起到重要作用。它介导高甘露糖和杂交寡聚糖的裂解。

产品介绍

Endo F1 大肠杆菌重组表达的高度特异性的糖苷内切酶，基因来源 Elizabethkingia miricola，是一种高度特异性糖苷内切酶，可以从糖蛋白上切除没有核心岩藻糖基化的高甘露糖、杂交型 N-聚糖，本产品活性高，稳定性好，可以用于抗体糖基化修饰和分析。

组分和说明

E755053	Component	300U	1KU	Storage
E755053A	Endo-β-N-acetylglucosaminidase F1	300U	1KU	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E755053B	10×Glycoprotein Denaturing Buffer (0.5% SDS, 40mM DTT)	1000μl	1000μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E755053C	10×GlycoBuffer 2 (500 mM Sodium Phosphate, pH7.5)	1000μl	1000μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.
E755053D	10% NP-40	1000μl	1000μl	-20℃. Avoid freeze/thaw cycle.

使用前准备：
使用前，请将 Endo F1试剂取出，加入30-50ul 的无菌去离子水溶解，10000rpm 离心10 秒，确保所有试剂都在管底。
反应试剂：将-20℃储存的 10×Glycoprotein Denaturing Buffer 缓冲液、10×GlycoBuffer 2 及 10%NP-40 溶液取出，待用。
注意：根据实验需要，准备相应的试剂，如非变性条件下进行去糖基化反应，不需要准备 10×Denaturing缓冲液及 10% NP-40 溶液。
使用方法：
变性条件下糖蛋白去糖基化
1、用去离子水溶解 1-20 µg 的糖蛋白，加入 1 µl 的 10×Glycoprotein Denaturing Buffer，用去离子水定容到10 µl；
2、75℃孵育 10 min；
3、加入 2 µl 的 500 mM Sodium acetate pH5.5，2 µl 的 10% NP-40，轻轻吹打混匀；
4、加入 1-4 µl 的 Endo F1，加去离子水到 20 µl，轻轻吹打混匀；
5、37℃孵育 1-4hr；
6、用于 SDS-PAGE 分析或 HPLC 分析。
非变性条件下糖蛋白去糖基化
1、取10-100µg 糖蛋白溶液，加入 2µl 500 mM Sodium acetate pH5.5,2-5µl Endo F1 ，补加纯化水使得反应体系总体积为 20µl，轻柔混匀；
2、37℃ 条件下反应 4-24hr。
注意：当对天然糖蛋白去糖基化时，建议将等量糖蛋白样品进行变性后再同步进行酶切实验作为阳性对照，以确定非变性条件下去糖基化反应的程度。
【注】体系放大时候，孵育时间或酶量需要根据实际情况调整，可低速震荡混匀，可以增加转化率。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅作科研用途！

生物活性

≥300U/ml，单位定义：10 μl的反应体系中，37℃反应 1 小时从变性的5 μg RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量。

表达系统

E. coli

种属

伊丽莎白病(Elizabethkingia miricola)

蛋白标签

N-His

Accession #

A0AAQ1SZ10

来源

重组表达

SDS-PAGE

32 kDa

储存与运输

物理形态	液体
储存缓冲液	20 mM Tris-HCl, 500mM NaCl, 10% Glycerol, pH 7.5.
浓度	≥300 U/mL
储存温度	-20°C储存,避免反复冻融
运输条件	超低温冰袋运输
稳定性与储存	长期储存-20℃（18个月）；避免反复冻融。
CAS编号和信息	37278-88-9
酶学委员会编号	3.2.1.96
分子类型	酶

质检证书（CoA,COO,BSE/TSE 和分析图谱)

C of A & Other Certificates(BSE/TSE, COO):

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批号(Lot Number)	证书类型	货号
ZJ25F0724231	分析证书	E755053
ZJ25F0724230	分析证书	E755053

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