简介：“适用于质谱分析” （又名：质谱级）

         “适用于质谱分析”（中文也称为MS级或质谱级）是指符合质谱（MS）应用严格纯度和性能标准的试剂，尤其是酶和化学品。这些试剂经过优化，可确保最低的背景噪音、高消解效率，并与下游LC-MS/MS工作流程兼容。

主要特点

1. 高纯度、低污染物

         · 不含角蛋白、自溶碎片、核酸酶、蛋白酶、盐或其他干扰物质。

         · 在 MS 分析中产生信号抑制或非特异性信号的试剂。

2. 持续表现

         · 已验证可重复的酶活性和裂解特异性。

         · 批次间的一致性对于定量蛋白质组学和测序至关重要。

3. 稳定性和配方

         · 稳定的冻干形式或不含甘油的液体形式提供，以兼容LC-MS 工作流程。

         · 配方中不含干扰 MS 检测的添加剂（例如 Tris、EDTA、甘油）。

常见的 MS 级蛋白酶

         在谈到这些酶在质谱工作流程中的应用时，中文通常将这些酶统称为“质谱级蛋白酶”。

典型应用

1.蛋白质组学

          · 蛋白质表达、修饰和相互作用的全面分析。

          · 无标记或基于标记的定量（例如，TMT、 iTRAQ ）。

2. 蛋白质和抗体测序

         · 从头测序或数据库驱动测序的肽的高分辨率映射。

         · 单克隆抗体（ mAb ）的碎片图谱。

3. 生物制药表征

         · 生物仿制药、治疗性抗体或ADC 结合位点的分析。

         · 翻译后修饰（PTM）分析（例如糖基化、磷酸化）。

4. 生物标志物的发现

         · 在临床或研究环境中检测低丰度生物标志物。

Summary Table (中文对照)

Selection Tips

         · 检查供应商认证：查找“MS 级”、“质谱验证”或“测序级”等术语。

         · 检查消化性能：在扩大规模之前用已知蛋白质验证酶的效率。

         · 避免使用稳定剂，除非其明显与 MS 兼容。

含酶消化和净化的 LC-MS 样品工作流程

         这是一个实用的分步协议，用于使用MS 级蛋白酶（如胰蛋白酶、Lys-C 或 Glu-C）制备用于LC-MS/MS 分析的蛋白质。

1. 样品制备

2. 酶消化

3. 肽清理

          在 LC-MS 之前去除盐、去垢剂或抑制剂：

方法选项：

         · C18 反相 SPE（固相萃取） – 例如 Sep-Pak 或 OMIX 吸头

         · StageTips – 家用 C18 吸头，适用于小样本

         · 磁珠净化——例如 SP3 方法（顺磁珠）

         确保最终洗脱是在与 LC-MS 兼容的溶剂中进行的（例如，水或 ACN 中的 0.1% FA）。

4. LC-MS/MS 分析

附：中文双语宣传册样式资料：质谱级蛋白酶样本前处理工作流程

适用于蛋白质组学、抗体序列分析、PTM研究等领域

样本处理流程（Sample Workflow）

酶解步骤（Enzymatic Digestion）

         · 使用质谱级酶（Trypsin、Lys-C、Glu-C）

         · 建议比例：酶:蛋白 = 1:50（可根据需求调整）

         · 温度：37°C

         · 时间：4–16 小时（可选择多酶联合消化）

肽段纯化（Peptide Cleanup） 

LC-MS/MS 分析建议（LC-MS/MS Setup）

适用范围

         · 蛋白质组学研究（Proteomics）

         · 抗体序列测定（Antibody Sequencing）

         · 后翻译修饰检测（PTMs: 磷酸化、糖基化等）

         · 生物制药质量控制（mAb、ADC等）

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